切换至 "中华医学电子期刊资源库"
高级检索
中华介入放射学电子杂志

中华介入放射学电子杂志 ›› 2019, Vol. 07 ›› Issue (01) : 40 -43. doi: 10.3877/cma.j.issn.2095-5782.2019.01.008

所属专题： 文献；

专题研究·神经介入

涂布介入器械的人血管内皮生长因子真核表达载体的构建
张一林1, 贺迎坤1,†(), 李天晓1,†(), 刘刚2, 胡延忠3, 崔秀坤3   
  1. 1. 450003　郑州大学人民医院介入中心
    2. 450003　河南省人民医院科研平台
    3. 475001　河南大学基础医学院
  • 收稿日期:2018-11-06 出版日期:2019-02-01
  • 通信作者: 贺迎坤, 李天晓
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(81601583); 河南省科技攻关项目(162102310268); 河南省卫生系统出国研修项目(2016054)

Construction of eukaryotic expression vector for recombinant vascular endothelial growth factor for coating interventional device

Yilin Zhang1, Yingkun He1,†(), Tianxiao Li1,†(), Gang Liu2, Yanzhong Hu3, Xiukun Cui3   

  1. 1. Interventional Therapy Center of Zhengzhou University People's Hospital, Zhengzhou 450003, China
    2. Scientific Research Platform of Henan Provincial People's Hospital, Zhengzhou 450003, China
    3. School of Basic Medical Sciences of Henan University, Kaifeng 475001, China
全文 ( ) 下载PDF ( ) 导出引用
引用本文：

张一林, 贺迎坤, 李天晓, 刘刚, 胡延忠, 崔秀坤. 涂布介入器械的人血管内皮生长因子真核表达载体的构建[J]. 中华介入放射学电子杂志, 2019, 07(01): 40-43.

Yilin Zhang, Yingkun He, Tianxiao Li, Gang Liu, Yanzhong Hu, Xiukun Cui. Construction of eukaryotic expression vector for recombinant vascular endothelial growth factor for coating interventional device[J]. Chinese Journal of Interventional Radiology(Electronic Edition), 2019, 07(01): 40-43.

目的：

构建可涂布于介入器械的人血管内皮生长因子（VEGF）真核表达载体。

方法：

根据人VEGFA（NM_001025366）目的序列设计引物制备目的基因及载体，双酶切载体pIRES2-ZsGreen1和目的基因homo VEGFA进行连接后转化入大肠杆菌，构建质粒pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA并测序鉴定。

结果：

目的基因VEGFA已连接到载体pIRES2-ZsGreen1，大小约1400 bp，与人VEGFA（NM_001025366）目的序列比对结果一致，未见变异。质粒pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA构建成功。

结论：

成功构建重组人血管内皮生长因子真核表达载体，可用于涂布介入器械表面进行下一步实验。

关键词: 血管内皮生长因子, 介入器械, 质粒, 基因
Objective:

To construct the eukaryotic expression vector for recombinant vascular endothelial growth factor (VEGF) for coating interventional device.

Methods:

The primer was designed to prepare the target gene and vector according to the sequence of human VEGFA (NM_001025366) , and then was connected and transformed to E. coli after double digestion of homo VEGFA and pIRES2-ZsGreen1 plasmids. Then the vector pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA was constructed and identified.

Results:

The target gene, VEGFA, has been connected to the vector pIRES2-ZsGreen1, which was a 1400 bp plasmid. The sequence alignment was consistent with that of human VEGFA (NM_001025366) and no mutation was found. Plasmid pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA was successfully constructed.

Conclusions:

The eukaryotic expression vector pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA is successfully constructed, and can be used to coat interventional device.

Key words: Vascular endothelial growth factor, Interventional device, Plasmid, Gene
图1 制备目的基因（M：DNA Marker；1：homo VEGFA）
图2 双酶切载体与目的基因（M：DNA Marker；1：pIRES2-ZsGreen1；2：homo VEGFA）
图3 构建重组质粒（M：DNA Marker；1：pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA-1；2：pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA-2；3：pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA-3；4：pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA-4）
[1]
Lutsep HL. Symptomatic intracranial stenosis: best medical treatment vs. intracranial stenting[J]. Curr Opin Neurol，2009，22(1):69-74.
[2]
Chimowitz MI, Lynn MJ, Derdeyn CP，et al. Stenting versus aggressive medical therapy for intracranial arterial stenosis[J]. N Engl J Med，2011，365(11):993-1003.
[3]
Jin M, Fu X, Wei Y，et al. Higher risk of recurrent ischemic events in patients with intracranial in-stent restenosis[J]. Stroke，2013，44(11):2990-2994.
[4]
Zhu SG, Zhang RL, Liu WH，et al. Predictive factors for in-stent restenosis after balloon-mounted stent placement for symptomatic intracranial atherosclerosis [J]. Eur J Vasc Endovasc Surg，2010，40(4):499-506.
[5]
Bach LA. Endothelial cells and the IGF system[J]. J Mol Endocrinol，2015，54(1):1-13.
[6]
饶璇，李元建.内皮细胞损伤与修复的研究进展[J].中国动脉硬化杂志，2017，25(5):531-535.
[7]
Gimbrone MA Jr, García-Cardena G. Endothelial cell dysfunction and the pathobiology of atherosclerosis [J]. Circ Res，2016，118(4):620-636.
[8]
Josko J, Gwózdz B, Jedrzejowska-Szypulka H，et al. Vascular endothelial growth factor（VEGF）and its effect on angiogenesis [J]. Med Sci Monit，2000，6(5):1047-1052.
[9]
刘朝辉，高晓虹.血管内皮生长因子及其受体的研究进展[J].中国药物与临床，2017，17(8):1162-1164.
[10]
Achen MG, Stacker SA. The vascular endothelial growth factor family: proteins which guide the development of the vasculature[J]. Int J Exp Pathol，1998，79(5):255-265.
[11]
Isner JM, Pieczek A, Schainfeld R，et al. Clinical evidence of angiogenesis after arterial gene transfer of phVEGF165 in patient with ischaemic limb [J]. Lancet，1996，348(9024):370-374.
[12]
贺迎坤，李天晓，白卫星，等.脑血管药物洗脱支架与金属裸支架治疗椎动脉狭窄的临床随机对照研究方案[J].中华介入放射学电子杂志，2016，4(2):109-114.
[13]
Robertson KE, McDonald RA, Oldroyd KG，et al. Prevention of coronary in-stent restenosis and vein graft failure: does vascular gene therapy have a role? [J]. Pharmacol Ther，2012，136(1):23-34.
[14]
Banai S, Jaklitsch MT, Shou M，et al. Angiogenic-induced enhancement of collateral blood flow to ischemic myocardium by vascular endothelial growth factor in dogs [J]. Circulation，1994，89(5):2183-2189.
[15]
Hendel RC, Henry TD, Rocha-Singh K，et al. Effect of intracoronary recombinant human vascular endothelial growth factor on myocardial perfusion evidence for a dose-dependent effect [J]. Circulation，2000，101(2):118-121.
[16]
陈良万，郭加强.外源性基因在在体血管壁中表达的实验研究[J].中华心血管病杂志，1995，23(4):294-295.
[17]
黄志雄，郭加强，李晓惠，等.可溶性支架转移基因的实验研究[J].中华外科杂志，1997，35(5):310-312.
[18]
Carmeliet P. VEGF gene therapy: stimulating angiogenesis or angioma-genesis? [J]. Nat Med，2000，6(10):1102-1103.
[1] 林昌盛, 战军, 肖雪. 上皮性卵巢癌患者诊疗中基因检测及分子靶向药物治疗[J]. 中华妇幼临床医学杂志(电子版), 2023, 19(05): 505-510.
[2] 罗丹, 孔为民, 陈姝宁, 赵小玲, 谢云凯. 子宫内膜异位症患者在位及异位内膜上皮细胞-间充质转化相关生物标志物的变化[J]. 中华妇幼临床医学杂志(电子版), 2023, 19(05): 530-539.
[3] 陈甜甜, 王晓东, 余海燕. 双胎妊娠合并Gitelman综合征孕妇的妊娠结局及文献复习[J]. 中华妇幼临床医学杂志(电子版), 2023, 19(05): 559-568.
[4] 李维, 莫俊俏. 儿童呼吸道耐药流感嗜血杆菌基因型鉴定及耐药分析对抗菌药物治疗选择的意义[J]. 中华实验和临床感染病杂志(电子版), 2023, 17(05): 315-323.
[5] 王得晨, 杨康, 杨自杰, 归明彬, 屈莲平, 张小凤, 高峰. 结直肠癌微卫星稳定状态和程序性死亡、吲哚胺2,3-双加氧酶关系的研究进展[J]. 中华普通外科学文献(电子版), 2023, 17(06): 462-465.
[6] 黄威, 刘启, 陈流华, 滕茶香, 区喆建, 刘韩笑, 陈健聪, 张昆松. 新定义的可预测肝癌预后的焦亡相关lncRNA模型[J]. 中华普通外科学文献(电子版), 2023, 17(05): 357-365.
[7] 袁育韬, 邢金琳, 谢克飞, 殷凯. CT征象及BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移的相关性[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(06): 611-614.
[8] 樊丽超, 郭瑾瑛, 陈鑫. 野生型RET与RET/PTC融合基因检测对甲状腺乳头状癌中央区淋巴结清扫的指导意义[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(06): 631-635.
[9] 彭雨诗, 苗芸, 严紫嫣. 宏基因组高通量测序诊断肾移植术后华支睾吸虫感染一例[J]. 中华移植杂志(电子版), 2023, 17(05): 297-299.
[10] 刘恒, 侯宇川. 膀胱癌新型灌注药物的研究进展[J]. 中华腔镜泌尿外科杂志(电子版), 2023, 17(05): 445-451.
[11] 许丁伟, 马江云, 李新成, 黄洁. Alagille综合征疑诊为先天性胆道闭锁一例并文献复习[J]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2023, 12(06): 681-687.
[12] 陈安, 冯娟, 杨振宇, 杜锡林, 柏强善, 阴继凯, 臧莉, 鲁建国. 基于生物信息学分析CCN4在肝细胞癌中表达及其临床意义[J]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2023, 12(06): 702-707.
[13] 王飞飞, 王光林, 孟泽松, 李保坤, 曹龙飞, 张娟, 周超熙, 丁源一, 王贵英. 敲低IMPDH1对结肠癌SW480、HT29细胞生物功能的影响[J]. 中华临床医师杂志(电子版), 2023, 17(08): 884-890.
[14] 高红琴, 陈晨, 陆瑞科, 王小雨, 张敏, 李少华, 郝梨岚, 黄新程, 关凌耀, 张韵红. 外阴阴道假丝酵母菌病对女性阴道-宫颈菌群的影响研究[J]. 中华临床医师杂志(电子版), 2023, 17(06): 720-725.
[15] 张许平, 刘佳成, 张舸, 杜艳姣, 李韶, 商丹丹, 王浩, 李艳, 段智慧. CYP2C19基因多态性联合血栓弹力图指导大动脉粥样硬化型非致残性缺血性脑血管事件患者抗血小板治疗的效果[J]. 中华脑血管病杂志(电子版), 2023, 17(05): 477-481.
阅读次数
全文


摘要

版权所有 中华医学会 中华医学电子音像出版社有限责任公司  京ICP备14006079号-1  网络出版服务许可证：(署)网出证(京)字第075号